测试ID：EHRL
Ehrlichia./anaplasma.，分子检测，PCR，血液

使用自动化的MANGA纯LC系统从血液中的病原体中提取核酸。然后将提取物转移到96孔浅细胞480皿中进行扩增。LightCycler 480是一种自动仪器，其在PCR的每个循环后放大和监测靶核酸（扩增子）的发育。PCR测定的DNA靶标是腹圈，热冲击蛋白型摩擦（GENEL）的开放读数框架基因区段，其在致病性物种的每种生物的1次复制的频率下存在anaplasma.和Ehrlichia.。通过PCR扩增特异性碱基对DNA靶序列。扩增子的检测是基于荧光共振能量转移（FRET），其利用杂交探针用含有供体荧光团，荧光素，在3'末端的荧光素和具有受体荧光团，LC-RED 640的第二杂交探针，5' 结尾。当存在目标扩增子时，LC-RED 640在特定波长处发出可测量和可量化的光信号。可以通过进行扩增子的熔化曲线分析来确认特定生物核酸的存在。使用熔化曲线分析的特征，测定引物和特定的杂交探针能够检测和区分Anaplasma Phagocytophilum.那ehrlichiosis chaffeensis，ehrlichia muriseauclairensis.， 和Ehrlichia ewingii / canis。由于近距离熔化曲线的附近Ehrlichia ewingii.和ehrlichia canis.在美国，该试验无法区分这两种生物体。real-time PCR在临床微生物实验室中的应用和挑战。在快速循环实时PCR中。由U Reischl, C Wittwer, F Cockerill编辑。施普林格,纽约,2002)

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