测试ID: EHRL
Ehrlichia./红孢子虫属、分子检测、PCR、血液

评估怀疑为急性无形体病或埃立克体病的病人

埃立克体病和无形体病是一组新兴的人畜共患蜱传感染引起的Ehrlichia.和红孢子虫属物种分别。这些迫使细胞内，革兰氏阴性的人力人物感染白细胞，并导致人类中潜在的发热疾病。

人颗粒细胞包膜症（HA）是由Anaplasma Phagocytophilum.，它通过感染的咬伤传播Ixodes.物种蜱虫。美国这种感染的流行病学非常类似于莱姆病（由Borrelia Burgdorferi.）和贝母源（主要引起巴贝西虫microti)，它们都有相同的蜱虫载体。血凝素在美国中西部北部和莱姆病流行的其他地区最为普遍。

人单核细胞埃立克菌病(HE)是由Ehrlichia.chaffeensis,这是由孤岛蜱传播的，科学家Americanum.．报告的大多数HE病例来自美国东南部和中南部地区。e ewingii.是犬粒细胞性埃利克希菌病的已知病因，偶尔也会在人类身上引起一种类似于he的疾病。临床特征和实验室异常类似于E chaffeensis感染和抗体到e ewingii.交叉反应与目前的血清学检测抗体E chaffeensis．

最近，Mayo诊所实验室检测了betway中国版一个新的物种Ehrlichia.在威斯康辛州和明尼苏达州接触过蜱虫的病人中这种生物与默斯因此被称为E缪里斯-比如代理商或EMLA。这个名字E缪里斯eauclairensis已在最近提出后的第一个案例中进行了描述。E缪里斯eauclairensis导致与ehrlichiosis的疾病相似E chaffeensis和ewingii，对免疫功能低下的宿主可能导致更严重的疾病。

大多数无形体病和埃立克体病的病例是亚临床或轻微的，但感染可严重和危及生命的一些个人。最常见的症状包括发烧、疲劳、不适、头痛和其他“流感样”症状，包括肌痛、关节痛和恶心。中枢神经系统受累可导致癫痫和昏迷。

诊断可能是困难的，因为病人的临床病程通常是轻微的和非特异性的。这种症状很容易与其他疾病混淆，如流感，或其他蜱传人畜共患疾病，如莱姆病、巴贝斯虫病和落基山斑疹热。蜱暴露后急性发热患者的埃立克体病诊断线索包括实验室白细胞减少或血小板减少和血清转氨酶水平升高。然而，虽然这些异常的实验室发现是常见的，他们不是特异性的。很少在外周血涂片上观察到粒细胞内或单核细胞桑椹，但这不是诊断人埃立克体病或无形体病的可靠方法。

明确的诊断通常通过PCR和血清学方法完成。血清学检测主要用于确认目的，通过证明4倍上升或落入特定抗体滴度Ehrlichia.物种或红孢子虫属抗原。目前还没有商业上可用的特异性血清学检测E缪里斯eauclairensis，但与另一个交叉反应性Ehrlichia.可通过血清学检测种属。

PCR技术允许直接检测来自患者的全血的病原体特异性DNA，是在疾病急性期间检测的优选方法。蛋黄酱PCR测定能够检测和区分一种嗜吞噬细胞菌，chaffeensis, ewingii，和缪里斯eauclairensis。

重要的是要注意并发感染吞噬噬菌体，Borrelia Burgdorferi，和巴贝西虫microti难道不像这些生物体一样罕见吗Ixodes.蜱媒，并对这些病原体进行额外的检测。

消极的

阳性结果表明存在特定的DNA查菲埃利希菌，ewingii那E缪里斯eauclairensis生物体,或Anaplasma Phagocytophilum.并支持ehrlichiosis或anaplasmosis的诊断。

阴性结果表明标本中没有这4种病原体的可检测DNA，但不排除这些生物体或活性或近期疾病的存在。

自从DNA为以来e ewingii.和的没有区别吗E犬属通过这种快速的PCR测定，阳性结果E ewingii /犬属表明来自这两种生物中的任何一种的DNA存在。

该测定不应用于筛选无症状的个体，并且只能用于测试患有ehrlichiosis或anaplasmosis的症状和症状。

阴性结果并不意味着没有疾病。

储存或运输的标本绘制或不当条件不足可能使测试结果无效。

该测试可能检测到DNAehrlichia canis.(据报道仅在委内瑞拉引起无症状感染)。

本PCR检测不检测里克塞西亚(原Ehrlichia.）Sennetsu，据报道，它会导致一种罕见的人类单核细胞增多症样疾病(在日本和马来西亚)。

以下验证数据支持使用此测定进行临床测试。

准确性/诊断敏感性和特异性：

将LightCycler (LC PCR)实时荧光定量PCR检测结果与常规PCR检测结果进行比较Anaplasma Phagocytophilum.127份独特的、存档的全血标本(常规PCR检测26份阳性和99份阴性标本)。以常规PCR为金标准，对其诊断灵敏度和特异性进行检测Anaplasma Phagocytophilum.是100％。此外，12名已知ehrlichia chaffeensis分离物和2埃立克体属ewingii对分离株(参考株)进行PCR检测，均为阳性。

补充数据(峰值研究):

为补充上述数据，我们在30个阴性全血样本中加入了Anaplasma Phagocytophilum.检测极限（LOD）（10拷贝/微升）处的阳性对照质粒。30个尖刺标本以致盲的方式运行，以及30个阴性（Nonspiked）标本。100％的尖刺标本是阳性的，100％的非膨胀标本为阴性。

分析灵敏度/检测限(LoD):

EDTA血液中每种检测方法的下限如下:

-红孢子虫属phagocytophilum =每微升大约有10个目标

-ehrlichia chaffeensis=每微升机约5个目标

-埃立克体属缪里斯eauclairensis=每微升约100个目标

-犬埃立克体属ewingii /=每微升约10个目标

分析特异性：

从下列生物体的提取物中未获得PCR信号:单纯疱疹病毒、eb病毒、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、化脓性链球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、汉赛巴尔通体、昆塔纳巴尔通体、斑疹伤寒立克次体、立克次体、刚地弓形虫、田鼠巴贝斯虫Mn，巴贝西虫microtiATCC 53899，Borellia burgdorferiATCC 51990，Ehrlichia Risticii.ATCC VR-986，和Anaplasma Marginale.．2ehrlichia canis.菌株(patient株和ATCC CRL-10390株)，熔化温度(Tm)为49.5℃(与埃立克体属ewingii）.也注意到一个正的熔化峰埃立克体属缪里斯（ATCC VR-1411），但TM（55.24℃）容易与靶生物的TM区分开。

精确：

茚满的精度为97％，并且测定的精度为96％。

参考范围：

从正常供体中进行五十个全血样标本，发现靶向或可检测的负面Ehrlichia.和红孢子虫属物种。

可报告范围：

这是一种定性分析，结果报告为阴性或阳性埃立克体属/红孢子虫属物种(阳性Anaplasma Phagocytophilum.那ehrlichia chaffeensis那埃立克体属缪里斯eauclairensis.或埃立克体属ewingii）.

1. Bakken JS，Dunler JS：人粒细胞ehrlichiosis。Clin Infect Dis 2000 Aug; 31（2）：554-560

2.Dunler JS, Bakken JS:人埃立克氏病:由蜱传播的新发现的感染。Ann Rev Med 1998;49:201-213

3.蜱媒人畜共患病的特异性诊断:巴贝斯虫病、人粒细胞型埃立克虫病和莱姆病。临床感染1999年5月1日;34(9):1184-1191

4.麦奎斯顿JH, Paddock CD, Holman RC, Childs JE:美国的人类埃利克菌病。Emerging infections Dis 1999 september - october;5(5):635-642

5.(1)一种新型致病性埃立克氏菌(Ehrlichia, Ehrlichia, Ehrlichia, Ehrlichia, Ehrlichia, Ehrlichia)医学杂志2011年8月4日;365(5):422-429

6.约翰逊DK，Schiffman E，Davis JP等人。人类感染埃立克体属缪里斯-比如病原体，美国，2007-2013。Emerging infections Dis 2015;21日(10):1794 - 99