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Adalimumab定量:
阿达木单抗酶联免疫吸附试验(ELISA)旨在测定EDTA血浆或血清样本中游离阿达木单抗(抗肿瘤坏死因子- α的治疗性抗体:tnf - α)的数量。在第一步孵育中,样品中的游离阿达木单抗与涂在平板上的特异性抗阿达木单抗单克隆抗体结合。为了去除所有未结合的物质,需要进行洗涤步骤。在进一步的孵育步骤中,加入过氧化物酶标记的抗体。四甲基联苯胺(TMB)被用作过氧化物酶的底物。最后,加入酸性停止溶液终止反应。颜色从蓝色变成了黄色。黄色的强度与样品中游离阿达木单抗的浓度成正比。利用从标准品中获得的值,生成吸光度单位(光密度:OD)与浓度的剂量响应曲线。样品中游离阿达木单抗的浓度直接由该曲线测定。(包装说明书:Adalimumab Drug Level ELISA试剂。 Immun Diagnostik; KR9657, ver 07/2019)
Adalimumab抗体:
该ELISA试剂盒用于检测抗肿瘤坏死因子受体阻断剂阿达木单抗(Humira)的抗体。在样品制备过程中,使用酸解将抗阿达木单抗抗体(ATA)与治疗性抗体阿达木单抗分离,以获得游离的ATA。通过添加过氧化物酶结合物(pod -治疗性抗体adalimumab)和示踪剂(生物素化治疗性抗体adalimumab),替代未标记的治疗性抗体,标记抗体可与ATA形成复合物。这种复合物通过生物素与链霉亲和素包被的微量滴定板结合。它是通过过氧化物酶与过氧化物酶结合将底物t TMB转化为蓝色产物来检测的。加入酸性溶液可使酶反应停止。样本从蓝色转换为黄色。颜色变化应在450nm的光度计中测量。使用截止控制来进行解释。(包装说明书:Adalimumab总ADA ELISA试剂。Immun Diagnostik; KR9651, ver 02/2019)
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