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在DHR123存在的情况下,将肝素全血标本钠全血试样在37摄氏度中孵育。添加佛罗威尔肉豆蔻酸酯(PMA)刺激剂,并与整个血样混合,以在37摄氏度下进行额外的孵育。然后将样品离心,然后在室温下用氯化铵裂解细胞沉淀。然后在室温下用活/死的生存力标记和CD15染色之前,将裂解样品用无叠PBS洗涤。最后,在分析之前,将细胞洗涤,离心并重悬于1%的帕拉甲醛中。通过使用生存力染料来鉴定可行的中性粒细胞,并通过CD15的存在进一步证实。未刺激的样品中约有20,000个可行的中性粒细胞事件用于设置用于流式细胞仪收集的事件数量的限制。结果被推导为PMA刺激和平均荧光强度后的Delta%DHR+中性粒细胞(MFI)。[2]:227-232)
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