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间接免疫荧光法测定:
在测试之前,病人的标本与肝粉去除pre-absorbed nonorgan-specific自身抗体。后申请一个复合基质的冷冻老鼠组织(大脑、肾脏和肠道)和清洗,fluorescein-conjugated goat-antihuman免疫球蛋白应用于检测患者免疫球蛋白的分布和模式绑定。(Pittock SJ, Kryzer TJ,列侬弗吉尼亚州:多种抗体共存并预测癌症,不是神经综合症。安神经。2004年11月,56 (5):715 - 719;Honorat是的,科莫罗夫斯基L,约瑟的KA, et al: IgLON5抗体:在20名患者神经系统的选择和结果。Neruol Neruoimmunol Neruoinflamm。2017年7月18日;4 (5):e385。doi: 10.1212 / NXI.0000000000000385)
放射免疫检定法:
复制整除的病人标本与我(125)标记抗原孵化。形成免疫复合物,通过添加二级(山羊)反人类的免疫球蛋白,是颗粒状的离心和清洗。伽马辐射洗颗粒数,平均每分钟计数(cpm)与高积极和消极结果相比控制血清。标本的cpm高于正常的人类带来的背景cpm标本测试确认积极性,需要获得一个值的滴定测定的线性范围。抗原结合能力(nmol / l)计算的cpm沉淀在稀释的线性范围值。(Griesmann通用电气、Kryzer TJ,列侬VA:自体抗体的重症肌无力和Lambert-Eaton肌无力的综合症。:玫瑰NR,汉密尔顿RG, et al, eds。临床和实验室的人工免疫学。6。ASM出版社,2002:1005 - 1012;琼斯,弗拉纳根EP, Pittock SJ, et AL:反应和成人治疗自身免疫性小脑性共济失调的结果。JAMA神经。2015年11月,72 (11):1304 - 1312 . doi: 10.1001 / jamaneurol.2015.2378)
免疫印迹:
从成年大鼠小脑神经元抗原提取水,全身的重组体人collapsin response-mediator protein-5 (CRMP-5),或完整的重组人类amphiphysin蛋白质变性,减少,在10%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离。通过增强化学发光免疫球蛋白检测autoradiographically。(Yu Z Kryzer TJ Griesmann通用电气、K金,Benarroch EE,列侬VA l: CRMP-5神经元自身抗体:肺癌和thymoma-related自身免疫的标志。安神经。2001年2月,49 [2]:146 - 154;Dubey D, Jitprapaikulsan J, Bi H, et al: Amphiphysin-IgG自身免疫性神经病变:一个可辨认的临床病理综合征。神经学。2019年11月12日,93 (20):e1873-e1880。doi: 10.1212 / WNL.0000000000008472)
免疫印迹:
执行所有步骤在环境温度(18-28摄氏度)利用EUROBlot仪器之一。病人血清稀释(1:12.5)添加到测试条(带包含制造和使用生化方法纯化重组抗原)在个人渠道和孵化30分钟。阳性血清样本将绑定到纯化重组抗原和消极的血清样本不会绑定。条清洗去除游离血清抗体,然后孵化与反人类的免疫球蛋白抗体(碱性phosphatase-labelled) 30分钟。条再次清洗去除的反人类的免疫球蛋白抗体和氯化氮蓝四唑/ 5-bromo-4-chloro-3-indolylphosphate(电视台/ BCIP)底物被添加。碱性磷酸酶酶将可溶性基质转换成彩色的不溶性产品膜上产生一个黑带。条通过照片捕捉数字化EUROBlot一EUROLineScan软件工具和评估。(奥康纳K, P水域,科莫罗夫斯基L, et al: GABAA受体自身免疫:多中心体验。神经Neuroimmunol Neuroinflamm。2019年4月4日,6 [3]:e552 doi: 10.1212 / NXI.0000000000000552)
细胞结合试验:
病人标本应用于复合幻灯片包含转染和nontransfected hek - 293细胞。孵化和洗涤后,fluorescein-conjugated goat-antihuman免疫球蛋白应用于检测患者免疫球蛋白的存在约束力。神经病学(包插入:IIFT:马赛克,间接免疫荧光试验指令。EUROIMMUN FA_112d-1_A_UK_C13 02/2019)
两栖的,AMPIS ANN1S, crm, DPPIS DPPTS,加比,帮派,NMDIS, PCAB2, PCABP, PCATR:
周一到周日
AMPCS、CS2CS DPPCS、GABCS LG1CS, nmdc:
星期一到星期五,星期天
CRMWS:
周一到周四
AMIBS、AN1BS AN2BS、PC1BS PCTBS:
星期一到星期五