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首先使用Roche Magna Pure系统提取临床标本的DNA。弓形虫弓形虫然后通过使用实时PCR扩增B1基因的靶序列来检测DNA。每个循环后,LightCycler放大并监视靶核酸的荧光发育。连续监测是从荧光共振能量转移(FRET)原理得出的:与供体荧光团在3'端上的杂交探针受到外部光源的激发,并发出的光被第二次杂交探针吸收的光,并带有受体荧光素的光。在5'端。受体荧光团散发出不同的波长的光,可以用与特定PCR产物量成正比的信号进行测量。放大后,使用熔融温度分析,用于对放大靶DNA的敏感和特异性检测(Cockerill FR,UHL FR:实时PCR的应用和挑战临床微生物学实验室。,C Wittwer,FCockerill。Springer,NY,2002年)
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