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IgM:
SeraQuest腮腺炎IgM是一种酶捕获方法。稀释后的样品在涂有抗人IgM单克隆抗体的孔中孵育。如果存在IgM抗体,则在孔中捕获IgM抗体。清洗孔,去除多余的样品。结合抗原复合物腮腺炎抗原与辣根过氧化物酶结合的单克隆抗体复合物添加并孵育微孔。抗原特异性IgM抗体将结合结合物。清洗微孔,去除多余的结合物。添加过氧化物酶底物并孵育微孔。添加停止溶液,将底物转化为黄色终产物,通过光度法读取。(包装插页:腮腺炎IgM.Quest International;2017年6月版)
IgG:
BioPlex 2200腮腺炎IgG检测采用多重流式免疫分析技术。简单地说,血清样品与样品稀释剂和涂有腮腺炎抗原的染色珠在37℃下混合和孵育。洗涤循环后,将与藻红蛋白(PE)结合的抗人IgG抗体添加到混合物中,并在37℃下孵育。在另一个洗涤循环中去除多余的结合物,并将珠子重新悬浮在洗涤缓冲液中。然后,珠子混合物通过检测器,该检测器基于染料荧光识别珠子,并通过所附PE的荧光确定抗原捕获的抗体量。原始数据以相对荧光强度计算。在每个反应混合物中存在三个额外的染色珠、一个内标珠、一个血清验证珠和一个试剂空白珠,以验证检测器响应、向反应容器中添加血清以及血清中不存在显著的非特异性结合。(包装插页:BioPlex 2200系统MMRV IgG.Bio-Rad实验室;2018年11月30日)
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