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使用活性的部分血栓形成时间(APTT)方法和因子缺陷基质对仪表实验ACL顶部进行因子VIII测定。将患者血浆合并并与因子VIII缺陷型基质(通过免疫吸收的因子VIII耗尽的正常血浆)和APTT试剂孵育。在指定的孵育时间之后,加入钙以引发混合物中的凝固过程。然后使用671nm的波长光学地测量凝块形成的时间。(Owen Ca Jr,Bowie EJW,Thompson JH JR:出血障碍的诊断。第二版。小,布朗和公司,1975; Meijer P,Verbruggen和SpannagiM:第33章:凝血因子和抑制剂:测定和解释。在实验室血液学实践中。由K Kottke-Marchant编辑。Wiley Blackwell Publishing,2012,PP 435-446)
因子VIII抑制剂筛网包括测量正常血浆和患者血浆混合物在37摄氏度下孵育正常血浆和患者血浆的混合物之前和之后的因子VIII活性(部分血栓形成时间的测定)。为了最佳灵敏度,因子VIII值将正常血浆调节至约20%,因为因子VIII测定在该曲线的该区域中更敏感。此外,过量的患者的血浆将使测试对少量抑制剂更敏感。(Owen Ca Jr,Bowie EJW,Thompson JH JR:出血障碍的诊断。第二版。小,棕色和公司,1975年,PP 143-145; Meijer P,Verbruggen和Spannagi M:第33章:凝血因子和抑制剂:测定和解释。在实验室血液学实践中。由K Kottke-Marchant编辑。Wiley Blackwell出版社,2012,PP 435-446)
如果抑制剂筛选为VIII因子抑制剂阳性,则该抑制剂将通过Bethesda试验进行定量。在Bethesda程序中,抑制剂是通过将等体积的连续稀释血浆与正常血浆混合来定量的。该混合物在37℃孵育2小时,同时测量其因子VIII活性并与对照运行进行比较。用患者的孵育混合液与对照组的因子VIII活性的差异来计算滴度。残留因子VIII活性转化为贝塞斯达单位:50%残留因子VIII等于1贝塞斯达单位。采用与Bethesda试验相同的基本原理,用于定量其他凝血因子的抑制剂。(Kasper CK, aldeort LM, Counts RB等:一个更统一的因子VIII抑制剂测量。Thromb death Haemorrh 1975;34:869-872;第33章:凝血因子和抑制剂:测定和解释。实验室血液学实践。由K Kottke-Marchant编辑。 Wiley Blackwell Publishing, 2012, pp 435-446)
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